Alternativní metody bez použití zvířat se používají častěji, než se obecně předpokládá, statistiky o jejich skutečném využití však bohužel chybí. Pokud je k dispozici validovaná alternativní metoda a je v souladu se současným stavem poznání vhodná, nelze pokus na zvířatech provádět (zákon č. 246/1992 Sb. na ochranu zvířat proti týrání, ve znění pozdějších předpisů). Před schválením pokusu na zvířatech státními orgány musí být důkladně zdůvodněno, proč nelze využít metody bez použití zvířat.
Určité metody in vitro mohou být například v rámci testovací strategie předřazeny pokusu na zvířatech a umožnit tak efektivní omezení počtu zvířat v následném pokusu in vivo (např. test vazby alergenu na protein in vitro, který předchází testu sensibilizace in vivo v pokusu na myších, nebo test cytotoxicity předcházející testu akutní toxicity in vivo). Některé metody in vitro jsou validovány pouze pro určitou skupinu chemických látek (např. tenzidy, konzervanty, ale ne pesticidy), nebo jen pro určitý toxikologický účinek. V takových případech je pak odůvodněné použití konvenční metody na zvířatech.
Při vývoji léčiv se zpravidla oba přístupy kombinují, tj. v případě potřeby se provádějí výzkumné metody bez zvířat následované studií se zvířaty. Interakce v těle a nežádoucí účinky však lze správně posoudit pouze při pokusech na zvířatech, např. lék na srdce má na izolovanou srdeční tkáň jiný účinek než při interakcích s játry, orgánem, kde se část léku odbourává a metabolizuje. Pro mnoho pokusů na zvířatech tak v současnosti nejsou k dispozici žádné spolehlivé alternativní metody. V některých případech národní nebo mezinárodní právní předpisy vyžadují, aby výzkumníci prováděli pokusy na zvířatech, protože alternativní metody dosud nebyly uznány a legislativně zakotveny.
Aktuální seznam validovaných alternativních metod schválených a přijatých Evropským centrem pro validaci alternativních metod (EURL-ECVAM) je dostupný na webových stránkách https://joint-research-centre.ec.europa.eu/eu-reference-laboratory-alternatives-animal-testing-eurl-ecvam_en
Existuje databáze metod pro zkoušení toxicity
